Kinectin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404296-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Kinectin 1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Kinectin 1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Kinectin 1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KTN1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Kinectin 1 Anticorpo (A-12): sc-374577
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Kinectin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404296-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Kinectin 1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404296-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
KTN1 codifica a cinectina 1, uma proteína integral de membrana enriquecida no retículo endoplasmático (RE) que atua como um suporte (scaffold) para o transporte baseado em microtúbulos. Ao interagir com motores de cinesina e com a maquinaria de tráfego associada, a cinectina dá suporte ao posicionamento de organelas, à dinâmica do RE e ao movimento direcional de vesículas que influenciam a secreção e a renovação de membranas. Esses processos se cruzam com a remodelação do citoesqueleto, a sinalização intracelular e as vias de proteostase, que com frequência são perturbadas em condições de estresse celular. Alterações no transporte dependente de cinectina e na organização do RE têm sido examinadas no contexto da neurobiologia e de outros distúrbios em que defeitos no transporte axonal, no tráfego de membranas ou na homeostase do RE contribuem para fenótipos relevantes para a doença.
Kinectin 1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KTN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KTN1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KTN1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KTN1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.