KIF20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド (h): sc-403194

概要

KIF20A（MKlp2とも呼ばれる）は、微小管に結合して有糸分裂の進行、中心紡錘体の組み立て、および細胞質分裂を協調的に制御するキネシン様モータータンパク質をコードします。微小管ダイナミクスや紡錘体チェックポイントに連動したプロセスの調節を通じて、適切な染色体分配とミッドボディ形成を支えます。KIF20Aの活性は、G2/M移行や有糸分裂終結を司る細胞周期制御経路とも結び付いており、その制御異常はヒト疾患における異常増殖や異数性の文脈でしばしば研究対象となります。有糸分裂関連モーターとして、KIF20Aはがん生物学モデルにおいて、細胞骨格リモデリング、分裂面の位置決め、ならびに増殖シグナル依存性を解析するための機能的ハブとして広く用いられています。

KIF20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）は、human細胞株におけるKIF20A遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、KIF20A内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、KIF20Aのオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、KIF20Aタンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、KIF20Aシグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、KIF20A欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• KIF20Aの機能に不可欠なKIF20Aエクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、KIF20Aゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• KIF20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h）およびKIF20A CRISPR/Cas9 KOプラスミド（h2）によってコードされるgRNAは、KIF20A遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  KIF20A HDRプラスミド（h）および KIF20A HDRプラスミド（h2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはKIF20Aホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のKIF20A標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。