Ki67 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400081-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Ki67O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ki67 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ki67 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para MKI67. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ki67 Anticorpo (Ki-67): sc-23900
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ki67 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400081-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ki67 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400081-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MKI67 codifica a Ki67, uma proteína nuclear associada à cromatina amplamente utilizada como marcador de células em ciclo ativo, com expressão máxima durante as fases S/G2/M e ausente em células quiescentes em G0. A Ki67 contribui para a organização cromossômica de ordem superior e auxilia na formação da periferia dos cromossomos mitóticos, ajudando a manter a segregação cromossômica adequada e a dinâmica da divisão celular. Por estar estreitamente acoplada a programas de proliferação, a Ki67 interage com redes regulatórias do ciclo celular e é frequentemente utilizada para estudar o controle do crescimento e as respostas ao estresse de replicação. A expressão desregulada de MKI67 está comumente associada a estados de hiperproliferação em diversos tipos de tumores, reforçando seu valor em estudos mecanísticos do controle do ciclo celular e da biologia do câncer.
Ki67 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus MKI67 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de MKI67. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função MKI67. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com MKI67 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.