Keratin 24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-414948

Visão geral

KRT24 codifica a queratina 24, uma proteína de filamento intermediário do tipo I que contribui para a rede do citoesqueleto em células epiteliais e sustenta a integridade estrutural específica de cada tecido e a resiliência mecânica. Como parte da montagem e do remodelamento dos filamentos de queratina, o KRT24 integra-se a processos mais amplos ligados ao citoesqueleto e à adesão que influenciam a forma celular, a polaridade e a função de barreira. Padrões alterados de expressão de queratinas são comumente associados a respostas ao estresse epitelial e a mudanças no estado de diferenciação, tornando o KRT24 um marcador útil e um ponto de entrada mecanístico para estudar o remodelamento epitelial em contextos relevantes para doenças. A desregulação da organização dos filamentos intermediários pode afetar a comunicação cruzada entre vias de sinalização e a homeostase celular, fornecendo base para investigar o KRT24 em modelos de disfunção epitelial.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Keratin 24 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KRT24 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KRT24, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KRT24 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Keratin 24.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KRT24 para a investigação da sinalização de Keratin 24, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KRT24 críticos para a função Keratin 24
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KRT24 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Keratin 24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Keratin 24 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KRT24. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Keratin 24 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Keratin 24 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KRT24 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KRT24 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.