KCTD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412124

Visão geral

KCTD3 (potassium channel tetramerization domain containing 3) codifica uma proteína contendo o domínio BTB/POZ, implicada em interações proteína–proteína que podem moldar a montagem de complexos multiproteicos e influenciar a proteostase. Membros da família KCTD são frequentemente associados à biologia de ligases de ubiquitina dependentes de cullin-3 (CUL3) e à regulação de intermediários de sinalização por meio de degradação direcionada, sugerindo papéis no ajuste fino de vias e na homeostase celular. Por meio dessas redes de interação, KCTD3 é relevante para estudos de controle do crescimento celular, respostas ao estresse e programas associados à diferenciação, nos quais o remodelamento dependente de ubiquitinação é proeminente. A desregulação de complexos centrados em BTB/KCTD tem sido associada a fenótipos relevantes para doenças em câncer e neurobiologia, sustentando a investigação de KCTD3 em modelos mecanísticos de sinalização alterada e controle de qualidade proteica.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KCTD3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KCTD3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KCTD3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KCTD3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KCTD3.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KCTD3 para a investigação da sinalização de KCTD3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KCTD3 críticos para a função KCTD3
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KCTD3 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo KCTD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo KCTD3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KCTD3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo KCTD3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR KCTD3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KCTD3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KCTD3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.