KCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-422973
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- KCC1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico KCC1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
KCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-422973 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Slc12a4 codifica o cotransportador K–Cl KCC1 (SLC12A4) do camundongo, um transportador eletroneutro que acopla o efluxo de K+ e Cl− para regular o cloreto intracelular, o volume celular e a homeostase iônica. A atividade do KCC1 contribui para vias de diminuição do volume regulada, respostas ao estresse osmótico e sinalização dependente de cloreto, que pode influenciar o potencial de membrana e a dinâmica do citoesqueleto. Em linhagens hematopoéticas e imunes, o KCC1 sustenta programas de fluxo iônico ligados à hidratação dos eritrócitos e aos estados de ativação de leucócitos, fornecendo contexto mecanístico para o estudo da fisiologia impulsionada pelo transporte. A desregulação do transporte K–Cl tem sido associada a alterações nas propriedades dos glóbulos vermelhos e a fenótipos inflamatórios ou metabólicos mais amplos, tornando o Slc12a4 um alvo útil para pesquisas sobre transporte iônico e homeostase.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO KCC1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Slc12a4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Slc12a4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Slc12a4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína KCC1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Slc12a4 para a investigação da sinalização de KCC1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Slc12a4 críticos para a função KCC1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Slc12a4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo KCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo KCC1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Slc12a4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo KCC1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR KCC1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Slc12a4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Slc12a4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.