Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin β3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402071-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- karyopherin β3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase karyopherin β3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase karyopherin β3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IPO5. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:karyopherin β3 Anticorpo (B-7): sc-55527
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
karyopherin β3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402071-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
karyopherin β3 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402071-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IPO5 codifica a carioferina β3 (importina-5), um recetor de transporte nuclear que reconhece sinais específicos de localização nuclear e medeia a importação, dependente da GTPase Ran, de cargas proteicas através do complexo do poro nuclear. Ao controlar o tráfego nucleocitoplasmático, a IPO5 ajuda a regular programas de transcrição, a progressão do ciclo celular e vias de sinalização associadas à diferenciação, por meio da regulação espacial de fatores de transcrição e proteínas ligantes de RNA. A atividade alterada de importinas e o transporte nuclear desregulado são características recorrentes no cancro e noutras doenças proliferativas, e a IPO5 tem sido associada a sinalização de crescimento aberrante devido à má localização de proteínas reguladoras. Como resultado, a IPO5 é frequentemente estudada no contexto da remodelação das vias de transporte nuclear, respostas ao stress e dependências em escala genómica em células transformadas.
karyopherin β3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IPO5 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IPO5. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IPO5. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IPO5 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.