Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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karyopherin α3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-410855
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- karyopherin α3 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico karyopherin α3, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:karyopherin α3 Anticorpo (B-1): sc-514101
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
karyopherin α3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-410855 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
KPNA3 codifica a carioferina α3, um adaptador da família importina-α que reconhece sinais clássicos de localização nuclear e se associa à importina β para mediar o transporte nucleo-citoplasmático dependente da GTPase Ran através do complexo do poro nuclear. Ao regular a entrada nuclear de fatores de transcrição, mediadores de sinalização e outras proteínas-carga, KPNA3 influencia programas de expressão gênica, o controle do ciclo celular, respostas ao estresse e a sinalização imune inata. Alterações na dinâmica do transporte nuclear envolvendo vias de importinas têm sido associadas à proliferação desregulada, à sinalização inflamatória e às interações hospedeiro–patógeno em múltiplos contextos de doença. Assim, KPNA3 é um alvo útil para investigar como a importação seletiva de cargas molda fenótipos celulares e redes de transdução de sinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO karyopherin α3 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene KPNA3 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do KPNA3, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do KPNA3 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína karyopherin α3.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de KPNA3 para a investigação da sinalização de karyopherin α3, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) KPNA3 críticos para a função karyopherin α3
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos KPNA3 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo karyopherin α3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo karyopherin α3 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus KPNA3. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo karyopherin α3 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR karyopherin α3 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia KPNA3 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo KPNA3 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.