Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Junctophilin-2 Double Nickaseプラスミド (h): sc-401805-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- Junctophilin-2 Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- Junctophilin-2ダブルニカースプラスミド（h）およびJunctophilin-2ダブルニカースプラスミド（h2）は、JPH2を標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: Junctophilin-2 抗体 (H-3): sc-377086
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
Junctophilin-2 Double Nickaseプラスミド (h) | sc-401805-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Junctophilin-2 Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-401805-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
JPH2は、形質膜と筋小胞体／小胞体の間にある接合膜複合体を安定化する、膜架橋型の構造タンパク質であるジャンクトフィリン2をコードします。ジャンクトフィリン2はこれらの膜を係留することで、興奮収縮連関のマイクロドメインの構築を助け、L型Ca²⁺チャネルとリアノジン受容体を協調的に配置することにより、カルシウム誘発性カルシウム放出を効率よく進めるのを支えます。JPH2に依存した構造は、Ca²⁺恒常性、下流のCa²⁺制御シグナル伝達、および横紋筋細胞におけるサルコメア機能に寄与します。JPH2の発現や機能の変化は、心筋症に関連するダイアド構造のリモデリング、異常なCa²⁺制御、ならびに心血管疾患モデル化に関連する不整脈性の細胞表現型と結び付けて報告されています。
Junctophilin-2 ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における JPH2 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、JPH2内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、JPH2の機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、JPH2が破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。