Josephin-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-418165-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Josephin-3O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Josephin-3 (h) e o Plasmídeo Double Nickase Josephin-3 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para TAF1D. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Josephin-3 Anticorpo (G-12): sc-514821
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Josephin-3 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-418165-NIC | 20 µg | $410.00 |
TAF1D codifica um fator associado a uma subunidade do TFIID, implicado na transcrição pela RNA polimerase I e na biogênese ribossomal no nucléolo, conectando a síntese de pré-rRNA ao controle do crescimento celular e à proteostase. Ao coordenar a função do promotor de rDNA e o processamento de pré-rRNA, o TAF1D sustenta a capacidade proliferativa e a remodelação do nucléolo adaptativa ao estresse. A desregulação de programas transcricionais dirigidos pela Pol I tem ampla relevância para a regulação do ciclo celular, a adaptação metabólica e respostas ao estresse proteotóxico, frequentemente alteradas no câncer e em outros distúrbios do controle do crescimento. Embora Josephin-3 seja um nome de proteína mais comumente associado a enzimas desubiquitinantes, este produto é especificado para o locus humano de TAF1D e é adequado para investigar fenótipos nucleolares e transcricionais decorrentes de perturbações de TAF1D.
Josephin-3 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus TAF1D em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de TAF1D. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função TAF1D. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com TAF1D interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.