JNK2 Plasmide KO CRISPR/Cas9 (bovine): sc-437284

Panoramica

JNK2 (MAPK9) è un’isoforma della chinasi N-terminale di c-Jun (JNK) all’interno della cascata MAPK attivata dallo stress, che trasduce segnali provenienti da citochine infiammatorie, stress ossidativo e vie dei fattori di crescita. Attraverso la fosforilazione di substrati quali c-JUN e altri componenti di AP-1, JNK2 modula programmi trascrizionali che controllano apoptosi, regolazione del ciclo cellulare, differenziamento e risposte immunitarie innate. L’attività di JNK2 interseca le vie di segnalazione TNF, TLR e NF-κB e contribuisce a una regolazione dipendente dal contesto delle risposte allo stress mitocondriale e del reticolo endoplasmatico (ER). Una segnalazione JNK deregolata è stata collegata a disfunzioni infiammatorie e metaboliche, neurodegenerazione e fenotipi associati ai tumori, supportandone l’impiego in studi meccanicistici su modelli rilevanti per la malattia, inclusi i sistemi bovini.

Il plasmide CRISPR/Cas9 KO JNK2 (bovine) è un pool di plasmidi progettato per la distruzione mirata del gene in linee cellulari bovine. Ciascun plasmide co-esprime un singolo RNA guida (sgRNA) unico che prende di mira un sito distinto all'interno del insieme alla nucleasi Cas9 di Streptococcus pyogenes. I plasmidi codificano anche per la GFP, consentendo l'identificazione fluorescente e l'arricchimento delle cellule trasfettate con successo tramite microscopia a fluorescenza o citometria a flusso.

Il design multi-guida aumenta la probabilità di generare inserzioni o delezioni (indels) che interrompono il frame di lettura aperto a seguito della formazione di rotture a doppio filamento mediate da Cas9. Le rotture del DNA introdotte dal sistema CRISPR/Cas9 vengono riparate attraverso vie endogene di giunzione non omologa (NHEJ), che spesso provocano mutazioni con spostamento del frame che annullano l'espressione della proteina JNK2.

Questo sistema di knockout CRISPR consente la generazione efficiente di modelli cellulari carenti di per lo studio della segnalazione di JNK2, studi di genomica funzionale, ricerca sulla biologia del cancro e valutazione delle risposte terapeutiche in linee cellulari umane.

Caratteristiche principali

• sgRNA mirati agli esoni critici per la funzione di JNK2
  Co-espressione di SpCas9 e sgRNA da un singolo plasmide per una somministrazione semplificata
  Reporter GFP per l'identificazione delle cellule trasfettate
  Pool di plasmidi mirati a più siti genomici di per migliorare l'efficienza del knockout
  Compatibile con la somministrazione tramite trasfezione

Varianti di progettazione

CRISPR +/- HDR

• Gli gRNA codificati dal JNK2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine) e dal JNK2 CRISPR/Cas9 KO Plasmid (bovine2) prendono di mira siti distinti all'interno del locus . Potrebbe essere disponibile uno o entrambi i design di targeting. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.
  I costrutti donatori HDR codificati dal JNK2 Plasmide HDR (bovine) e il plasmide HDR JNK2 (bovine2) contengono una cassetta di resistenza alla puromicina e un reporter RFP affiancato da bracci di omologia per supportare la riparazione diretta dall'omologia in siti bersaglio definiti corrispondenti ai disegni CRISPR/Cas9 KO. La disponibilità dei donatori HDR può variare. Vedere Prodotti correlati per la disponibilità.

Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.