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| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JAK2 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421200-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAK2 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421200-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino Jak2 codifica la tirosin-chinasi non recettoriale JAK2, un mediatore centrale della segnalazione dei recettori per le citochine che collega il legame del ligando alla fosforilazione dei fattori di trascrizione STAT. L’attività di JAK2 si integra con le vie JAK–STAT, MAPK/ERK e PI3K–AKT per regolare l’ematopoiesi, la differenziazione delle cellule immunitarie, l’infiammazione e l’omeostasi metabolica. Studi in vivo e cellulari collegano l’alterazione di Jak2 a risposte modificate all’eritropoietina e alla trombopoietina, alla segnalazione da stress e a un controllo della crescita deregolato, rendendolo rilevante per modelli di mieloproliferazione e disfunzione immunitaria. In quanto hub di segnalazione, JAK2 è spesso impiegato per analizzare le cascate di chinasi prossimali al recettore e i programmi trascrizionali a valle delle citochine.
JAK2 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Jak2 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Jak2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Jak2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Jak2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.