Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Jagged1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421197
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Jagged1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Jagged1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Jagged1 Anticorpo (E-12): sc-390177
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Jagged1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421197 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Jag1 codifica o ligante de membrana Jagged1, um ativador canônico dos receptores Notch que regula a sinalização juxtácrina responsável por controlar decisões de destino celular, formação de fronteiras e padronização tecidual no camundongo. A interação Jagged1–Notch desencadeia a liberação proteolítica do domínio intracelular de Notch e a reprogramação transcricional por meio de complexos RBPJ/CSL, moldando processos como angiogênese, manutenção de células-tronco e progenitoras e interações epitélio–mesênquima. Em modelos de desenvolvimento e de doença, alterações na sinalização Jag1/Notch estão associadas à diferenciação desregulada, remodelamento vascular aberrante e mudanças no comportamento de células imunes e estromais. Como a resposta de Notch depende fortemente do contexto, a perda de função de Jag1 oferece uma forma direta de dissecar, in vivo e em células cultivadas, limiares de sinalização específicos do ligante e o crosstalk com outras vias.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Jagged1 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Jag1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Jag1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Jag1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Jagged1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Jag1 para a investigação da sinalização de Jagged1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Jag1 críticos para a função Jagged1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Jag1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Jagged1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Jagged1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Jag1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Jagged1 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Jagged1 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Jag1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Jag1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.