Jagged1 CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (m): sc-421197

개요

Jag1은 막 결합 리간드인 Jagged1을 암호화하며, 마우스에서 세포 운명 결정, 경계 형성, 조직 패터닝을 조절하는 접촉 의존성(juxtacrine) 신호전달을 제어하는 Notch 수용체의 정형적(대표적) 활성인자입니다. Jagged1–Notch 결합은 Notch 세포내 도메인의 단백질분해적 방출과 RBPJ/CSL 복합체를 통한 전사 재프로그래밍을 유도하여, 혈관신생, 줄기·전구세포 유지, 상피–간엽 상호작용 등의 과정을 형성합니다. 발달 및 질병 모델에서 Jag1/Notch 신호의 변화는 분화 조절 이상, 비정상적 혈관 리모델링, 면역 및 기질(stromal) 세포 행동의 변화와 연관되어 있습니다. Notch의 출력은 맥락 의존성이 매우 높기 때문에, Jag1 기능상실은 생체 내 및 배양 세포에서 리간드 특이적 신호 임계값과 경로 간 크로스토크를 규명하는 직접적인 방법을 제공합니다.

Jagged1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m)는 mouse 세포주에서 Jag1 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 Jag1 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 Jag1의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 Jagged1 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 Jagged1 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 Jag1 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• Jagged1 기능에 중요한 Jag1 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 Jag1 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• Jagged1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m) 및 Jagged1 CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는 gRNA는 Jag1 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  Jagged1 HDR 플라스미드 (m) 및 Jagged1 HDR 플라스미드 (m2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 Jag1 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 Jag1 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.