Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ITM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-405155
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ITM1 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico ITM1, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ITM1 Anticorpo (A-2): sc-390227
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ITM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-405155 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O STT3A humano codifica a subunidade catalítica do complexo oligosacariltransferase (OST), que medeia a glicosilação N‑ligada co‑traducional no retículo endoplasmático. Ao transferir oligossacarídeos pré‑montados para resíduos de asparagina em polipeptídeos nascente, o STT3A dá suporte ao dobramento proteico, ao controlo de qualidade e ao tráfego intracelular, além de influenciar a degradação associada ao RE e a proteostase. A perturbação da glicosilação dependente de STT3A pode comprometer a maturação de proteínas de membrana e secretadas, alterar a sinalização de recetores e imunitária e ativar a resposta a proteínas mal dobradas. Vias de N‑glicosilação desreguladas têm sido associadas a distúrbios congénitos da glicosilação e são frequentemente remodeladas no cancro e noutras doenças caracterizadas por stress do RE e por glicoproteomas de superfície celular alterados.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO ITM1 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene STT3A em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do STT3A, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do STT3A na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína ITM1.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de STT3A para a investigação da sinalização de ITM1, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) STT3A críticos para a função ITM1
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos STT3A para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo ITM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo ITM1 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus STT3A. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo ITM1 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR ITM1 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia STT3A para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo STT3A definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.