Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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ISG15 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400996-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ISG15O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ISG15 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ISG15 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ISG15. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ISG15 Anticorpo (F-9): sc-166755
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ISG15 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400996-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ISG15 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400996-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O ISG15 codifica um modificador do tipo ubiquitina induzido por interferão, rapidamente induzido por interferões do tipo I e por stress celular. A conjugação do ISG15 a proteínas substrato (ISGilação) é mediada pela enzima E1 UBA7, pela E2 UBE2L6 e por ligases E3 como a HERC5, e é revertida pela deISGilase USP18, integrando o ISG15 em redes de imunidade inata e de proteostase. O ISG15 influencia a restrição antiviral, a regulação da amplitude da sinalização por interferão e a modulação da tradução e do turnover proteico, tendo sido também descritas, em alguns contextos, atividades extracelulares semelhantes às de citocinas. A desregulação do ISG15/ISGilação tem sido associada a alterações nas interações hospedeiro–patógeno, interferonopatias, fenótipos inflamatórios e sinalização imunitária relacionada com o cancro, tornando-o um alvo relevante para estudos mecanísticos das vias do interferão.
ISG15 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ISG15 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ISG15. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ISG15. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ISG15 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.