IRF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-424184

概要

マウスのIrf5は、自然免疫によるセンサー入力を下流の炎症性遺伝子プログラムと統合する転写因子であるインターフェロン調節因子5（IRF-5）をコードしています。IRF-5は、エンドソームToll様受容体（TLR）およびMyD88依存性シグナル伝達の下流で活性化され、インターフェロン刺激遺伝子の協調的な制御を介して、I型インターフェロンおよび炎症性サイトカインのネットワークの発現を促進します。マクロファージ、樹状細胞、B細胞では、IRF-5が極性化やエフェクター応答に寄与し、サイトカインのバランスや抗原依存的免疫応答を形成します。IRF-5活性の異常は自己免疫および炎症性の表現型と関連づけられており、Irf5はマウスモデルにおける全身性免疫調節異常に関わる経路を解析するための有用な結節点となります。

IRF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIrf5遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Irf5内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Irf5のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IRF-5タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IRF-5シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Irf5欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IRF-5の機能に不可欠なIrf5エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Irf5ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IRF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIRF-5 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Irf5遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IRF-5 HDRプラスミド（m）および IRF-5 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIrf5ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIrf5標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。