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IRAK-2双切口酶质粒(h) | sc-404304-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IRAK-2双切口酶质粒(h2) | sc-404304-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
人类 IRAK2 基因编码白细胞介素-1 受体相关激酶 2(IRAK-2),属于丝氨酸/苏氨酸激酶家族成员,是 Toll 样受体(TLR)和 IL-1 受体下游的核心信号中间体。IRAK-2 参与 MyD88 依赖性的信号复合物形成,促进 NF-κB 与 MAPK 通路的激活,并塑造调控炎性细胞因子与先天免疫反应的转录程序。通过在含 TIR 结构域受体信号传导中的作用,IRAK-2 影响免疫细胞激活、病原体应答信号,以及与应激和凋亡相关通路的串扰。IRAK2 相关信号的失调与多种疾病背景下观察到的异常炎症状态和免疫信号改变有关,因此可作为通路机制研究中的重要靶点。
IRAK-2 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 IRAK2 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对IRAK2内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏IRAK2的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了IRAK2基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。