Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
IP-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421031
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- IP-10 El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico IP-10, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: IP-10 Anticuerpo (E-2): sc-374092
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
IP-10 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421031 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Cxcl10 codifica la quimiocina IP-10 (CXCL10), un ligando secretado inducible por interferón que se une a CXCR3 para dirigir la quimiotaxis de linfocitos T activados, células NK y otras poblaciones inmunitarias. IP-10 suele inducirse aguas abajo de IFN-γ/STAT1 y de vías de detección de patógenos, modulando el tráfico de leucocitos, la activación endotelial y las redes de citocinas inflamatorias. En modelos murinos, Cxcl10 contribuye al reclutamiento de células inmunitarias en tejidos infectados o dañados e influye en el equilibrio entre inmunidad protectora e inmunopatología. La señalización desregulada de CXCL10 se utiliza con frecuencia como marcador y como nodo mecanístico en estudios de inflamación crónica, respuestas tipo autoinmunes y remodelación del microambiente inmune tumoral.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO IP-10 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Cxcl10 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Cxcl10 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Cxcl10 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IP-10.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Cxcl10 para la investigación de la señalización de IP-10, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Cxcl10 críticos para la función de IP-10
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Cxcl10 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido IP-10 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IP-10 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Cxcl10. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IP-10 (m) y el plásmido HDR IP-10 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Cxcl10 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Cxcl10 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.