Integrin αX/ITGAX/CD11c Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-421170-LAC

Itgax codifica a integrina αX (CD11c), que forma um heterodímero com a integrina β2 (CD18), constituindo o receptor de complemento 4 (CR4), um receptor essencial de adesão e fagocitose em linhagens mieloides, incluindo células dendríticas, macrófagos e subpopulações de monócitos. O CD11c participa da adesão e migração de leucócitos e da formação da sinapse imune por meio de interações com ligantes como iC3b e ICAMs, conectando sinais extracelulares à remodelação do citoesqueleto e a vias de sinalização a jusante que modulam a captação e a apresentação de antígenos. Na imunologia de camundongos, o ITGAX é amplamente utilizado como marcador e regulador funcional da diferenciação de células dendríticas e do tráfego tecidual, com relevância para respostas inflamatórias e desregulação imune em modelos de autoimunidade, infecção e imunologia tumoral. A perturbação da expressão de Itgax ajuda a investigar estados de ativação de células mieloides, a função de células apresentadoras de antígeno e mecanismos de depuração dependentes do complemento in vivo e in vitro.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin αX/ITGAX/CD11c (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Itgax numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin αX/ITGAX/CD11c (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Itgax, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Integrin αX/ITGAX/CD11c. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Itgax e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.