Integrin αV/ITGAV/CD51 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-400506-LAC

ITGAV codifica a integrina αV (CD51), uma subunidade α que se associa a integrinas β (comumente ITGB3, ITGB5, ITGB6 ou ITGB8) para formar recetores de ligandos da matriz extracelular, como vitronectina, fibronectina, osteopontina e complexos latentes de TGF-β. Por meio de sinalização outside-in e inside-out, as integrinas contendo αV regulam a dinâmica das adesões focais, a remodelação do citoesqueleto de actina e a mecanotransdução via as vias FAK/SRC, PI3K–AKT e MAPK. A integrina αV também contribui para a migração e invasão celulares, a sinalização de sobrevivência e a comunicação cruzada com recetores de fatores de crescimento, moldando a remodelação tecidular e as respostas inflamatórias. A atividade desregulada de ITGAV e a sinalização mediada por integrinas αV são frequentemente estudadas na progressão do cancro, angiogénese, fibrose e na biologia óssea e imunitária, contextos em que estão implicadas alterações de adesão e programas de ativação de TGF-β.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin αV/ITGAV/CD51 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de ITGAV numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin αV/ITGAV/CD51 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição ITGAV, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Integrin αV/ITGAV/CD51. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo ITGAV e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.