Integrin αV/ITGAV/CD51CRISPR激活质粒(h): sc-400506-ACT

ITGAV 编码整合素 αV（CD51），这是一种 α 亚基，可与多种 β 亚基伙伴（如 β3、β5、β6、β8）形成异源二聚体，构成识别细胞外基质配体的受体；这些配体常含有 RGD 基序，例如玻连蛋白（vitronectin）、纤维连接蛋白（fibronectin）和骨桥蛋白（osteopontin）。通过与配体结合及整合素聚簇，含 αV 的整合素协调黏着斑（focal adhesion）的组装与机械传导（mechanotransduction），激活 FAK/SRC 信号以及下游 PI3K–AKT 和 MAPK 通路，从而调控细胞黏附、迁移、生存与细胞骨架重塑。ITGAV 还通过 αVβ6/αVβ8 介导的潜在型 TGF-β（latent TGF-β）活化与 TGF-β 生物学发生联系，将基质感知与炎症和纤维化程序连接起来。ITGAV 活性失调与侵袭性细胞行为、血管生成反应以及与癌症进展、纤维化和免疫微环境相互作用相关的组织重塑表型有关。

Integrin αV/ITGAV/CD51 CRISPR激活质粒（h）提供了一种靶向、非破坏性的方法，可在不改变底层DNA序列的情况下上调内源性ITGAV的表达。

Integrin αV/ITGAV/CD51 CRISPR激活质粒（h）是一个由三条质粒组成的协同激活介导（SAM）系统，旨在对人类细胞系中的ITGAV基因座进行高效、位点特异性的转录上调。该系统以一种携带两个失活突变（D10A 和 N863A）的无催化活性的 Cas9（dCas9）为核心，这些突变消除了核酸酶活性，同时保留了 DNA 结合能力。该 dCas9 与强效转录激活因子 VP64 融合，并与用于筛选的布拉西定抗性基因共同表达。第二个质粒编码MS2-p65-HSF1融合蛋白——这一二级激活复合物与dCas9-VP64协同作用，并携带潮霉素抗性基因。第三个质粒编码靶标特异性20 nt sgRNA，其与两个MS2 RNA适配体融合，这些适配体可将MS2-p65-HSF1复合物招募至激活位点，并携带嘌呤霉素抗性基因。这三个质粒按1:1:1的质量比递送，以确保系统所有组分的平衡表达。

在靶位点组装完成后，SAM复合物结合于ITGAV转录起始位点上游约200 bp处，VP64、p65和HSF1在此协同作用，招募转录 machinery并驱动内源性Integrin αV/ITGAV/CD51表达上调。与具有核酸酶活性的Cas9不同， dCas9不会引入双链断裂或修改基因组序列，从而保留了原生的ITGAV位点，并能够研究内源性位点上依赖于Integrin αV/ITGAV/CD51的转录反应，使其成为功能研究、靶基因鉴定以及在ITGAV表达被沉默或降低的肿瘤细胞中模拟Integrin αV/ITGAV/CD51通路恢复的宝贵工具。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。