Integrin β8/ITGB8 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-435838-LAC

O gene Itgb8 de camundongo codifica a integrina β8 (ITGB8), uma subunidade β que se associa principalmente à subunidade αv para formar o receptor αvβ8, responsável por mediar a adesão célula–matriz extracelular e a sinalização bidirecional. A ITGB8 é um regulador-chave da ativação do TGF-β latente na superfície celular, conectando o engajamento com a matriz a programas transcricionais dependentes de SMAD que influenciam interações epitélio–mesênquima, modulação imune e remodelamento tecidual. Por meio de complexos associados às integrinas, envolvendo sinalização de adesões focais e dinâmica do citoesqueleto, a ITGB8 ajuda a coordenar migração, função de barreira e mecanotransdução. A atividade desregulada de ITGB8 tem sido associada a processos patológicos de remodelamento, incluindo fibrose e invasão relacionada ao câncer, tornando-a um alvo relevante para o estudo de redes de sinalização dependentes do microambiente.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin β8/ITGB8 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Itgb8 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin β8/ITGB8 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Itgb8, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Integrin β8/ITGB8. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Itgb8 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.