Integrin α7/ITGA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421165

Visão geral

Itga7 codifica a integrina α7 (ITGA7), uma subunidade α que forma um heterodímero com a integrina β1 para constituir um recetor de ligação à laminina, enriquecido no músculo esquelético e cardíaco. Este recetor de adesão liga a matriz extracelular ao citoesqueleto de actina e contribui para a adesão, migração e diferenciação de mioblastos, ao mesmo tempo que molda a sinalização através de complexos de adesão focal que envolvem FAK/Src, ILK e as vias PI3K–AKT e MAPK a jusante. A mecanotransdução dependente de ITGA7 sustenta a estabilidade das fibras musculares e a organização da junção neuromuscular, ligando sinais extracelulares de laminina à remodelação intracelular do citoesqueleto. Alterações na função ou na expressão de ITGA7 estão associadas a comprometimento da integridade muscular e a fenótipos semelhantes aos distróficos em sistemas modelo, tornando-a um alvo útil para estudar o desenvolvimento e a regeneração muscular, bem como a sinalização da matriz extracelular.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Integrin α7/ITGA7 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Itga7 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Itga7, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Itga7 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Integrin α7/ITGA7.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Itga7 para a investigação da sinalização de Integrin α7/ITGA7, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Itga7 críticos para a função Integrin α7/ITGA7
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Itga7 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Integrin α7/ITGA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Integrin α7/ITGA7 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Itga7. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Integrin α7/ITGA7 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Integrin α7/ITGA7 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Itga7 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Itga7 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.