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Integrin α4/ITGA4/CD49d双切口酶质粒(h) | sc-401336-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α4/ITGA4/CD49d双切口酶质粒(h2) | sc-401336-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ITGA4 编码整合素 α4(CD49d),是一种黏附受体,可与 β1 或 β7 配对形成 α4β1 和 α4β7 异源二聚体,从而调控白细胞运输、牢固黏附以及跨内皮迁移。通过与 VCAM1、纤连蛋白等配体结合,整合素 α4 协调由外向内(outside-in)信号传导,并与细胞骨架重塑及细胞存活通路相衔接,包括黏着斑、PI3K–AKT 和 MAPK 信号。ITGA4 的活性有助于免疫细胞在组织内的定位,并通过调节细胞–细胞与细胞–基质相互作用影响炎症微环境。整合素 α4 依赖的黏附与迁移失调已被认为与慢性炎症性疾病及血液系统恶性肿瘤的生物学相关,因此可作为研究免疫与肿瘤–基质相互作用的一个重要节点。
Integrin α4/ITGA4/CD49d 双切酶质粒(h)由一对匹配的质粒组成,专为在 human 细胞系中对 ITGA4 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对ITGA4内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏ITGA4的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了ITGA4基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。