Integrin β3/ITGB3/CD61 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (m): sc-421175-LAC

Itgb3 codifica a integrina β3 (CD61), um recetor transmembranar de adesão que se associa às subunidades αIIb ou αV para formar integrinas centrais para a agregação plaquetária, as interações célula–matriz e a mecanotransdução. A sinalização “outside-in” e “inside-out” mediada por ITGB3 coordena a dinâmica das adesões focais e a remodelação do citoesqueleto através de vias como FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, influenciando assim a migração, a sobrevivência e a diferenciação. Em modelos murinos, a função de Itgb3 é amplamente estudada na biologia da trombose e da hemostase, bem como na angiogénese e nas interações estromais associadas a tumores, onde alterações na sinalização das integrinas podem modular a inflamação e a remodelação tecidular.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin β3/ITGB3/CD61 (m) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de Itgb3 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais Integrin β3/ITGB3/CD61 (m) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição Itgb3, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de Integrin β3/ITGB3/CD61. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo Itgb3 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.