Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-421161-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Integrin α3/ITGA3/CD49cO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Integrin α3/ITGA3/CD49c (m) e o Plasmídeo Double Nickase Integrin α3/ITGA3/CD49c (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Itga3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Integrin α3/ITGA3/CD49c Anticorpo (A-3): sc-374242
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-421161-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Integrin α3/ITGA3/CD49c Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-421161-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Itga3 codifica a integrina α3 (CD49c), que forma um heterodímero com a integrina β1 para constituir um recetor de ligação à laminina, mediando a adesão célula–matriz extracelular e a organização da membrana basal. A sinalização dependente de ITGA3 regula a dinâmica das adesões focais, a remodelação do citoesqueleto e a polaridade das células epiteliais por vias que incluem FAK/Src, PI3K–AKT e MAPK, influenciando migração, proliferação e sobrevivência. Em tecidos de rato, a integrina α3 contribui para a integridade epitelial em órgãos como pele, pulmão e rim, e a sua desregulação é frequentemente estudada em contextos de adesão alterada, inflamação e fenótipos invasivos relevantes para a biologia do cancro e a remodelação tecidular.
Integrin α3/ITGA3/CD49c O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Itga3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Itga3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Itga3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Itga3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.