Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Insulin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400149-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- InsulinO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Insulin (h) e o Plasmídeo Double Nickase Insulin (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para INS. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Insulin Anticorpo (2D11-H5): sc-8033
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Insulin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400149-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Insulin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400149-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
INS codifica a insulina, um hormônio peptídico sintetizado como pré-proinsulina nas células β pancreáticas e processado na via secretória para regular a captação e o armazenamento sistêmicos de glicose. A sinalização da insulina ocorre por meio da ativação do receptor de insulina e das cascatas downstream PI3K–AKT e MAPK, que coordenam o tráfego de transportadores de glicose, a síntese de glicogênio, o metabolismo lipídico e a expressão gênica. O controle rigoroso da transcrição de INS, do dobramento do pró-hormônio e da exocitose de grânulos é central para o sensoriamento de nutrientes e a homeostase das células β. A desregulação da produção ou da sinalização de insulina está fortemente associada ao diabetes e a fenótipos metabólicos relacionados, tornando INS um nó-chave para estudar a função de células endócrinas e a interconexão entre vias metabólicas.
Insulin O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus INS em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de INS. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função INS. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com INS interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.