Inhibin β-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421132

Visão geral

Inhbc codifica a subunidade beta-C da inibina em camundongos, membro da superfamília TGF-β que pode contribuir para a formação dos ligantes activina e inibina, influenciando assim a sinalização dependente de SMAD. Ao modular a atividade da via TGF-β/activina, a Inibina β-C está implicada na regulação de programas de diferenciação celular, na homeostase tecidual e no controle da proliferação de forma dependente do contexto. Um desequilíbrio na sinalização de activina/inibina está associado a respostas inflamatórias e fibróticas desreguladas e tem sido ligado a alterações em processos reprodutivos e endócrinos em múltiplos sistemas modelo. Em pesquisas com camundongos, o Inhbc oferece um ponto acessível para dissecar a disponibilidade de ligantes e as respostas transcricionais a jusante dentro das redes da superfamília TGF-β.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Inhibin β-C (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Inhbc em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Inhbc, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Inhbc na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Inhibin β-C.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Inhbc para a investigação da sinalização de Inhibin β-C, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Inhbc críticos para a função Inhibin β-C
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Inhbc para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo Inhibin β-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo Inhibin β-C Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Inhbc. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo Inhibin β-C Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR Inhibin β-C (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Inhbc para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Inhbc definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.