ING2 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-404193-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- ING2O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase ING2 (h) e o Plasmídeo Double Nickase ING2 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para ING2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:ING2 Anticorpo (B-5): sc-271544
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
ING2 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-404193-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
ING2 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-404193-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
ING2 (membro 2 da família de inibidores de crescimento) codifica uma proteína supressora de tumor associada à cromatina que atua como leitora epigenética por meio do seu domínio PHD, reconhecendo H3K4me3 para acoplar marcas de histonas a desfechos transcricionais. ING2 participa das respostas a danos no DNA e do controle do ciclo celular ao modular programas dependentes de p53 e ao cooperar com complexos de acetilação/desacetilação de histonas que influenciam a acessibilidade da cromatina. Por meio dessas atividades, ING2 impacta vias que governam a apoptose, a senescência e a estabilidade do genoma. Alterações na expressão ou na função de ING2 têm sido associadas a remodelamento de cromatina desregulado e foram relatadas em múltiplos contextos relacionados ao câncer, tornando-o um nó útil para estudos mecanísticos do controle epigenético.
ING2 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus ING2 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de ING2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função ING2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com ING2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.