IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド (m): sc-431212

概要

Igf2bp1 は、RNA 結合タンパク質 IMP-1/IGF2BP1 をコードする遺伝子であり、KH ドメインを介して標的 mRNA を認識し、その局在、安定性、翻訳を調節する転写後制御因子です。マウス細胞において IGF2BP1 は、リボヌクレオタンパク質（RNP）顆粒内での mRNA の運命決定や細胞骨格に沿った輸送経路を通じて、増殖および分化に関連するプログラムの協調に寄与します。その制御ネットワークは、増殖・発生に関わるシグナル伝達軸と交差しており、細胞状態の遷移、移動に伴う RNA 局在、翻訳制御への影響という観点からしばしば研究されています。IGF2BP1 に関連する RNA プログラムの破綻は、がん原性表現型や組織恒常性の変化に関与すると示唆されており、疾患関連モデルにおける遺伝子発現制御機構の研究において重要です。

IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）は、mouse細胞株におけるIgf2bp1遺伝子の標的破壊を目的として設計されたプラスミドのプールである。各プラスミドは、Igf2bp1内の異なる部位を標的とする固有のシングルガイドRNA（sgRNA）と、Streptococcus pyogenes由来のCas9ヌクレアーゼを共発現します。また、これらのプラスミドはGFPをコードしており、蛍光顕微鏡やフローサイトメトリーを用いて、トランスフェクションに成功した細胞を蛍光で識別・濃縮することが可能です。

このマルチガイド設計により、Cas9による二本鎖切断の形成後に、Igf2bp1のオープンリーディングフレームを破壊する挿入または欠失（インデル）が生じる可能性が高まります。CRISPR/Cas9システムによって導入されたDNA切断は、内因性の非相同末端結合（NHEJ）経路を通じて修復され、その結果、IMP-1/IGF2BP1タンパク質の発現を阻害するフレームシフト変異が生じることが頻繁にあります。

このCRISPRノックアウトシステムにより、IMP-1/IGF2BP1シグナル伝達、機能ゲノミクス研究、がん生物学研究、およびヒト細胞株における治療反応の評価を目的とした、Igf2bp1欠損細胞モデルの効率的な作製が可能となる。

主な特徴

• IMP-1/IGF2BP1の機能に不可欠なIgf2bp1エクソンを標的とするsgRNA
  導入を簡素化するための、単一プラスミドからのSpCas9およびsgRNAの共発現
  トランスフェクトされた細胞を識別するためのGFPレポーター
  ノックアウト効率を向上させるための、Igf2bp1ゲノム上の複数の部位を標的とするプラスミドのプール
  トランスフェクションによる導入に対応

設計バリエーション

CRISPRs +/- HDR

• IMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m）およびIMP-1/IGF2BP1 CRISPR/Cas9 KOプラスミド（m2）によってコードされるgRNAは、Igf2bp1遺伝子座内の異なる部位を標的としています。いずれか一方、または両方の標的設計が利用可能な場合があります。入手可能性については「関連製品」を参照してください。
  IMP-1/IGF2BP1 HDRプラスミド（m）および IMP-1/IGF2BP1 HDRプラスミド（m2）によってコードされるHDRドナー構築体は、プロマイシン耐性カセットとRFPレポーターを含み、これらはIgf2bp1ホモロジーアームに挟まれており、CRISPR/Cas9 KO設計に対応する特定のIgf2bp1標的部位でのホモロジー依存修復をサポートします。HDRドナーの入手可能性は異なる場合があります。入手可能性については「関連製品」をご確認ください。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。