IL-8RA Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401645-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-8RAO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-8RA (h) e o Plasmídeo Double Nickase IL-8RA (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CXCR1. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-8RA Anticorpo (B-1): sc-7303
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-8RA Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401645-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-8RA Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401645-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O CXCR1 codifica o receptor alfa da interleucina-8 (IL-8RA), um GPCR de sete domínios transmembrana que se liga a quimiocinas CXC ELR+ como CXCL8/IL-8 para coordenar a quimiotaxia, adesão, desgranulação e explosão oxidativa de neutrófilos. Após a ligação do ligante, o IL-8RA acopla-se a proteínas G para ativar o fluxo de PLCβ/Ca²⁺, PI3K–AKT, MAPK/ERK e a sinalização por pequenas GTPases, moldando a remodelação do citoesqueleto e a migração direcionada. A atividade do CXCR1 integra-se à vigilância imune inata e às redes de citocinas inflamatórias, influenciando o tráfego de leucócitos em tecidos infectados ou danificados. A desregulação da sinalização de CXCR1 tem sido associada a condições inflamatórias crônicas e à inflamação associada a tumores, por seus efeitos no recrutamento de células mieloides e na formação de microambientes inflamatórios.
IL-8RA O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CXCR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CXCR1. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CXCR1. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CXCR1 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.