IL-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421112
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-5 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-5, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-5 Anticorpo (B-2): sc-398334
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421112 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Il5 codifica a interleucina-5 (IL-5), uma citocina associada a Th2 que coordena o compromisso de linhagem, a sobrevivência e a ativação de eosinófilos, além de apoiar a proliferação de células B e a troca de classe em camundongos. A IL-5 sinaliza por meio do receptor de IL-5 (IL5RA com a cadeia β comum), ativando as vias JAK/STAT, MAPK e PI3K, o que molda programas imunes do tipo 2 e o tráfego de granulócitos. A atividade desregulada de IL-5 está ligada à inflamação mediada por eosinófilos e a respostas alérgicas nas vias aéreas, tornando Il5 um nó central para dissecar redes de citocinas que controlam a imunidade de mucosas. Em modelos experimentais, a perturbação de Il5 é utilizada para estudar diferenciação de leucócitos, circuitos quimiotáticos e a comunicação cruzada entre citocinas durante respostas a helmintos e inflamação alérgica.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-5 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il5 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il5, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il5 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-5.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il5 para a investigação da sinalização de IL-5, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il5 críticos para a função IL-5
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il5 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-5 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il5. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-5 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-5 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il5 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il5 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.