IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401045-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-3/IL-5/GM-CSFRβO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-3/IL-5/GM-CSFRβ (h) e o Plasmídeo Double Nickase IL-3/IL-5/GM-CSFRβ (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para CSF2RB. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Anticorpo (1C1): sc-21765
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401045-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-3/IL-5/GM-CSFRβ Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401045-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
CSF2RB codifica a cadeia beta comum (βc) partilhada pelos recetores humanos de IL-3, IL-5 e GM-CSF, formando complexos de sinalização de alta afinidade que regulam a proliferação, a sobrevivência e a diferenciação de progenitores hematopoiéticos. Após a ligação da citocina, a sinalização dependente de βc ativa as vias JAK2/STAT5, PI3K–AKT e RAS–MAPK, coordenando o compromisso com a linhagem mieloide e as funções efetoras inflamatórias. A atividade de CSF2RB molda as respostas de granulócitos e macrófagos e influencia transições de estado celular induzidas por citocinas nos sistemas imunitário e hematológico. A desregulação da sinalização de βc tem sido associada a ativação mieloide aberrante e a programas inflamatórios, tornando CSF2RB um nó-chave para estudos mecanísticos da sinalização de recetores de citocinas.
IL-3/IL-5/GM-CSFRβ O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus CSF2RB em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de CSF2RB. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função CSF2RB. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com CSF2RB interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.