IL-2Rα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401262-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-2RαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-2Rα (h) e o Plasmídeo Double Nickase IL-2Rα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IL2RA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-2Rα Anticorpo (C-9): sc-393326
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-2Rα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401262-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-2Rα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401262-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL2RA codifica a cadeia alfa do recetor de interleucina-2 (IL-2Rα, CD25), um componente de alta afinidade do complexo do recetor de IL-2 que atua em conjunto com IL2RB e IL2RG para mediar a deteção de IL-2. A ativação de recetores que contêm IL-2Rα promove sinalização de STAT5 dependente de JAK1/JAK3 e programas transcricionais mais amplos que regulam a proliferação, a sobrevivência e a diferenciação de células T, com particular importância para a manutenção de células T reguladoras e para a homeostase imunitária. A expressão de CD25 é regulada de forma dinâmica durante a ativação dos linfócitos e ajuda a ajustar a capacidade de resposta a citocinas no eixo IL-2/STAT. A desregulação da sinalização ou da expressão de IL2RA tem sido associada a patologias mediadas pelo sistema imunitário e a estados funcionais alterados das células T, tornando-o um alvo frequente de estudos mecanísticos em imunologia.
IL-2Rα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IL2RA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IL2RA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IL2RA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IL2RA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.