IL-28R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402530
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-28R O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-28R, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-28R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-402530 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IFNLR1 codifica a subunidade alfa do receptor de interleucina-28 (IL-28Rα), o componente de ligação ao ligante do complexo receptor de interferon do tipo III, que atua em parceria com IL10RB para mediar respostas ao IFN-λ (IL-28/IL-29). A ligação ao receptor ativa a sinalização JAK–STAT, promovendo a formação de STAT1/STAT2–IRF9 (ISGF3) e a indução de genes estimulados por interferon, que moldam a imunidade inata em epitélios e em sítios de barreira. A expressão de IFNLR1 é enriquecida em tecidos epiteliais, contribuindo para uma sinalização antiviral e inflamatória compartimentalizada, distinta das vias de interferon do tipo I. A desregulação da sinalização IFN-λ/IFNLR1 tem sido associada a alterações na homeostase imune das mucosas e à suscetibilidade a fenótipos de doenças inflamatórias e infecciosas em contextos respiratórios e gastrointestinais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-28R (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IFNLR1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IFNLR1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IFNLR1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-28R.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IFNLR1 para a investigação da sinalização de IL-28R, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IFNLR1 críticos para a função IL-28R
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IFNLR1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-28R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-28R Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IFNLR1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-28R Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-28R (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IFNLR1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IFNLR1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.