Il-28a Plasmídeo duplo de Nickase (m2): sc-437298-NIC-2
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmidO plasmídeo de dupla Nickase (m2) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid (m2) e o Plasmídeo Double Nickase Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid (m22) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Ifnl2. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Il-28a Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-437298-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene murino Gbp2b codifica um membro da família das proteínas ligantes de guanilato, implicado na imunidade celular intrínseca induzida por interferons, na qual contribui para a restrição antimicrobiana e para a coordenação da sinalização imune inata a jusante das vias JAK–STAT e dos programas de genes estimulados por interferon. A proteína Il-28a (também conhecida como IFN-λ2) é um interferon do tipo III que sinaliza por meio do complexo receptor IFNLR1/IL10RB para ativar respostas transcricionais mediadas por STAT1/STAT2–IRF9 (ISGF3), moldando as defesas antivirais epiteliais e das mucosas e modulando redes de citocinas inflamatórias. A desregulação dessas vias é relevante para estudos de suscetibilidade a vírus, imunidade de barreira e fenótipos inflamatórios crônicos, incluindo inflamação das vias aéreas e do trato gastrointestinal. A edição gênica de Gbp2b ou Il-28a em modelos murinos permite a dissecação mecanística do crosstalk de interferons, das interações patógeno-hospedeiro e de programas transcricionais a jusante, usando desafios infecciosos, transcriptômica e perfilamento de células imunes.
Il-28a CRISPR/Cas9 KOPlasmid O Plasmídeo de Nickase Dupla (m2) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Ifnl2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Ifnl2. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Ifnl2. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Ifnl2 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.