IL-1RII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421099
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-1RII O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-1RII, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-1RII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421099 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Il1r2 codifica o receptor de interleucina-1 tipo II de camundongo (IL-1RII), um membro atípico da família de receptores de IL-1 que atua predominantemente como um receptor “isca” (decoy) para IL-1α e IL-1β. Ao se ligar aos ligantes de IL-1 sem gerar sinalização efetiva, o IL-1RII limita a disponibilidade do ligante para o IL-1R1 e atenua cascatas inflamatórias a jusante que, de outra forma, ativariam programas de transcrição dependentes de NF-κB e MAPK. A atividade do IL-1RII ajuda a ajustar a ativação da imunidade inata, o recrutamento de leucócitos e a amplificação de redes de citocinas em compartimentos mieloides e estromais. Alterações na expressão ou no shedding (liberação clivada) de IL-1RII têm sido associadas a respostas inflamatórias desreguladas relevantes para inflamação autoimune, biologia de infecções e modelos de lesão tecidual.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-1RII (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il1r2 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il1r2, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il1r2 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-1RII.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il1r2 para a investigação da sinalização de IL-1RII, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il1r2 críticos para a função IL-1RII
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il1r2 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-1RII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-1RII Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il1r2. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-1RII Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-1RII (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il1r2 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il1r2 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.