IL-1ra CRISPR/Cas9 케이오 플라스미드 (h): sc-401313

개요

인간 IL1RN 유전자는 인터루킨-1 수용체 길항제(IL-1ra)를 암호화하며, IL-1ra는 분비성 조절 인자로서 IL-1α 및 IL-1β가 IL-1 수용체 I형(IL-1 receptor type I)에 결합하는 것을 경쟁적으로 억제함으로써 하위의 MyD88 의존성 신호전달을 약화시킵니다. IL-1ra는 IL-1에 의해 유도되는 NF-κB 및 MAPK 경로의 활성화를 억제하여, 사이토카인 생성, 백혈구 유주, 급성기 염증 반응을 조절하는 전사 프로그램을 조절합니다. IL1RN 활성의 조절 이상은 비정상적인 선천면역 신호전달 및 변화된 염증 기준점(set point)과 연관되어 있어, 자가염증, 관절염 관련 경로, 더 넓은 사이토카인 네트워크 조절 연구에서 중요합니다. 또한 IL1RN은 대식세포, 상피세포, 기질(stromal) 구획에서 인플라마좀–IL-1 축의 동역학과 피드백 조절을 탐구하기 위한 마커 노드로도 활용됩니다.

IL-1ra CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h)는 human 세포주에서 IL1RN 유전자의 표적 파괴를 위해 설계된 플라스미드 풀입니다. 각 플라스미드는 IL1RN 유전자 내의 서로 다른 부위를 표적으로 하는 고유한 단일 가이드 RNA(sgRNA)와 Streptococcus pyogenes Cas9 뉴클레아제를 함께 발현합니다. 또한 이 플라스미드들은 GFP를 암호화하여, 형광 현미경이나 유세포 분석기를 통해 성공적으로 형질전환된 세포를 형광으로 식별하고 농축할 수 있게 합니다.

다중 가이드 설계는 Cas9에 의한 이중 가닥 절단 형성 후 IL1RN의 개방 독서 틀(ORF)을 파괴하는 삽입 또는 결실(indel)이 발생할 가능성을 높입니다. CRISPR/Cas9 시스템에 의해 유발된 DNA 절단은 내인성 비동종 말단 결합(NHEJ) 경로를 통해 복구되며, 이는 종종 IL-1ra 단백질 발현을 소멸시키는 프레임 시프트 돌연변이를 초래합니다.

이 CRISPR 녹아웃 시스템은 IL-1ra 신호 전달 연구, 기능 유전체학 연구, 암 생물학 연구 및 인간 세포주에서의 치료 반응 평가를 위한 IL1RN 결핍 세포 모델을 효율적으로 생성할 수 있게 합니다.

주요 특징

• IL-1ra 기능에 중요한 IL1RN 엑손을 표적하는 sgRNA
  전달을 단순화하기 위해 단일 플라스미드에서 SpCas9 및 sgRNA의 공동 발현
  형질전환된 세포 식별을 위한 GFP 리포터
  녹아웃 효율 향상을 위해 여러 IL1RN 게놈 부위를 표적하는 플라스미드 풀
  형질전환을 통한 전달과 호환

설계 변형

CRISPRs +/- HDR

• IL-1ra CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h) 및 IL-1ra CRISPR/Cas9 KO 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는 gRNA는 IL1RN 유전자좌 내의 서로 다른 부위를 표적화합니다. 표적화 설계 중 하나 또는 둘 다 이용 가능할 수 있습니다. 구입 가능 여부는 관련 제품을 참조하십시오.
  IL-1ra HDR 플라스미드 (h) 및 IL-1ra HDR 플라스미드 (h2)에 의해 암호화되는
  HDR 기증자 컨스트럭트는 푸로마이신 내성 카세트와 RFP 리포터를 포함하며, 이는 CRISPR/Cas9 KO 설계에 해당하는 정의된 IL1RN 표적 부위에서의 상동성 유도 복구를 지원하기 위해 IL1RN 상동성 암으로 둘러싸여 있습니다. HDR 기증자의 재고 여부는 달라질 수 있습니다. 재고 여부는 관련 제품을 참조하십시오.

연구용으로만 사용하세요. 진단 또는 치료용이 아닙니다.