IL-1F9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406176
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-1F9 O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-1F9, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-1F9 Anticorpo (Y-12): sc-80056
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-1F9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406176 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
IL36G codifica a interleucina-36 gama (IL-1F9), uma citocina da família IL-1 que atua como uma alarmina derivada de células epiteliais e mieloides para amplificar as respostas imunes inatas e adaptativas. Após ativação proteolítica, a IL-1F9 sinaliza por meio do complexo receptor de IL-36 (IL1RL2/IL1RAP), desencadeando as vias de NF-κB e MAPK e promovendo a expressão de quimiocinas e mediadores inflamatórios que recrutam e ativam leucócitos. Esse eixo contribui para a imunidade de barreira na pele e em superfícies mucosas e modula a inflamação associada a Th17 por meio de interação com os programas de IL-17/IL-23. A desregulação da atividade de IL36G tem sido implicada em doenças inflamatórias da pele, como a psoríase, e em contextos mais amplos de inflamação tecidual crônica, tornando-a um alvo útil para estudar a amplificação de redes de citocinas e a sinalização imune epitelial.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-1F9 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene IL36G em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do IL36G, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do IL36G na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-1F9.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de IL36G para a investigação da sinalização de IL-1F9, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) IL36G críticos para a função IL-1F9
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos IL36G para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-1F9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo IL-1F9 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus IL36G. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-1F9 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR IL-1F9 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia IL36G para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo IL36G definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.