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IL-17R双切口酶质粒(m) | sc-421093-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-17R双切口酶质粒(m2) | sc-421093-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
小鼠 Il17ra 编码 IL-17R,这是一种 I 型跨膜受体亚基,可与 IL-17 家族细胞因子结合,在上皮与基质细胞区室以及髓系细胞谱系中启动促炎信号传导。配体结合后促进适配蛋白 ACT1 的招募,并激活下游 NF-κB、MAPK 和 C/EBP 通路,从而驱动趋化因子与细胞因子表达程序,协调中性粒细胞动员与屏障免疫。IL-17R 信号与 Th17 驱动的免疫反应相互交叉,并在自身免疫与炎症性疾病模型(包括关节炎、皮炎和气道炎症)中促进组织炎症与重塑。因此,解析 Il17ra 的功能对于在小鼠体系中研究细胞因子驱动的宿主防御机制以及炎症网络的调控具有重要意义。
IL-17R 双切酶质粒(m)由一对匹配的质粒组成,专为在 mouse 细胞系中对 Il17ra 位点进行高特异性编辑而设计。每个质粒分别表达Cas9 D10A切口酶和针对Il17ra内不同DNA链的独特sgRNA。当这两种切口酶被引导至相邻但位于DNA链相反侧的位点时,会产生错位的单链切口,从而共同形成错位双链断裂,这需要两个引导RNA在靶位点上协同发挥作用。由此产生的DNA断裂通过内源性细胞修复途径(最常见的是非同源末端连接(NHEJ))得到修复,从而导致插入或缺失,进而破坏Il17ra的功能。通过要求双sgRNA在靶位点结合,双切口方法提高了编辑特异性,并为需要对靶向精度进行额外控制的应用提供了互补的CRISPR策略。
为高效识别编辑后的细胞,其中一个质粒编码GFP以实现转染细胞群的荧光可视化,而配套质粒则携带嘌呤霉素抗性基因用于抗生素筛选。这些特性共同支持共转染细胞群的高效富集,并简化了Il17ra基因失活克隆的验证流程。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。