IL-12B p40 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401407-NIC

IL12B codifica a subunidade p40 da IL-12B, um componente compartilhado das citocinas heterodiméricas IL-12 (p35/p40) e IL-23 (p19/p40), que coordenam respostas imunes inatas e adaptativas. Por meio da sinalização dos receptores de IL-12 e IL-23, as citocinas que contêm p40 ativam as vias JAK/STAT, promovem a polarização Th1/Th17 e sustentam programas antimicrobianos mediados por IFN-γ e a expressão de genes inflamatórios. A expressão de IL12B em células apresentadoras de antígeno é rigidamente regulada por sinais de receptores de reconhecimento de padrões, incluindo sinalização por TLR e NF-κB, conectando a detecção de microrganismos à produção de citocinas. A atividade desregulada de IL12B tem sido implicada na fisiopatologia de inflamação crônica e autoimunidade e em alterações na defesa do hospedeiro, o que a torna um foco frequente de estudos mecanísticos em modelos de imunologia e inflamação.

IL-12B p40 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IL12B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IL12B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IL12B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.

Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IL12B interrompido.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.