Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IL-10Rβ Double Nickaseプラスミド (h): sc-404666-NIC
- 対象生物種: human
- 20 µg のトランスフェクション準備済み、精製したプラスミドDNA、～20回トランスフェクション
- IL-10Rβ Double Nickaseプラスミド (h)はペアのプラスミドを含みます。それぞれのプラスミドはD10A変異したCas9 nuclease、及びCRISPR/Cas9 KOの対応よりも高い特異性で遺伝子発現をノックアウトするように設計された標的特異的な20 ntガイドRNA (gRNA)をコードします。
- ペアリングしたガイドRNAは、約20 bpでずらすことにより、ゲノムDNAの特定Cas9媒介のdouble nickingを可能にし、DSBを模造します。
- ペアの1つのプラスミドは選択用のピューロマイシン耐性遺伝子を含みます；ペアのほかの1つのプラスミドは、視覚的にトランスフェクションを確認するGFPマーカーを含みます。
- IL-10Rβダブルニカースプラスミド（h）およびIL-10Rβダブルニカースプラスミド（h2）は、IL10RBを標的とする異なるペアのgRNA設計をコードしています。いずれか一方、あるいは両方のデザインが利用可能である場合があります
- トランスフェクションの後、遺伝子ノックアウト効果は、抗体を用いたWB、IFまたはIHCによって検定されることができます: IL-10Rβ 抗体 (F-6): sc-271969
注文情報
| 製品名 | カタログ # | 単位 | 価格 | 数量 | お気に入り | |
IL-10Rβ Double Nickaseプラスミド (h) | sc-404666-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-10Rβ Double Nickaseプラスミド (h2) | sc-404666-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL10RBは、インターロイキン10受容体βサブユニット（IL-10Rβ）をコードします。IL-10Rβは、IL-10、IL-22、IL-26、およびIII型インターフェロン（IFN-λ）の受容体を含む複数のクラスIIサイトカイン受容体で共有される、必須の補助鎖です。リガンドが結合すると、IL-10Rβは各リガンド特異的なαサブユニットと会合し、JAK1/TYK2の活性化と下流のSTATシグナル伝達を支えて、炎症、上皮バリア機能、抗ウイルス応答を制御する転写プログラムを形成します。そのため、この受容体サブユニットは、粘膜表面および骨髄系・リンパ系コンパートメントにおける、サイトカイン駆動性の免疫恒常性の維持に中心的な役割を担います。IL10RB依存的シグナルの撹乱は、感染生物学、炎症性病態、免疫介在性メカニズムに関わるサイトカイン応答の破綻という観点から、しばしば研究対象となっています。
IL-10Rβ ダブルニカースプラスミド（h）は、human 細胞株における IL10RB 座の高特異性編集のために設計された、対となる2つのプラスミドから構成される。各プラスミドは、Cas9 D10Aニカースと、IL10RB内の対向するDNA鎖を標的とする異なるsgRNAを発現する。対向するDNA鎖上の隣接する部位に誘導されると、2つのニカースはオフセットした一本鎖切断を生成し、これらが組み合わさってずれた二本鎖切断を生じさせる。これにより、両方のガイドによる協調的なオンターゲット活性が必要となる。生じたDNA切断は、細胞内の内在性修復経路、特に非相同末端結合（NHEJ）によって修復され、その結果、IL10RBの機能を阻害する挿入または欠失が生じる。標的座標における2つのsgRNAの結合を必要とするこの二重ニッキング法は、編集の特異性を高め、標的精度に対するさらなる制御が求められる用途において、CRISPR戦略を補完するものである。
編集された細胞を効率的に同定するために、1つのプラスミドはトランスフェクトされた細胞集団を蛍光可視化するためのGFPをコードし、もう1つのプラスミドは抗生物質選別用のプロマイシン耐性遺伝子を保有しています。これらの機能により、共トランスフェクトされた細胞集団の効率的な濃縮が可能となり、IL10RBが破壊されたクローンの検証が簡素化されます。
研究用のみ。診断用または治療用ではありません。