IL-10Rα Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402486-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-10RαO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IL-10Rα (h) e o Plasmídeo Double Nickase IL-10Rα (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IL10RA. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IL-10Rα Anticorpo (A-3): sc-365374
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-10Rα Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402486-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IL-10Rα Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402486-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
IL10RA codifica a cadeia alfa do recetor da interleucina-10 (IL-10Rα), um componente de ligação de alta afinidade necessário para a sinalização anti-inflamatória dependente de IL-10. Após a ligação do ligando, o IL-10Rα associa-se ao IL10RB para ativar JAK1/TYK2 e, a jusante, programas transcricionais mediados por STAT3 que limitam a produção de citocinas pró-inflamatórias e modulam a função das células apresentadoras de antigénio. Esta via molda a homeostase imunitária mieloide e linfoide em locais mucosos e sistémicos, influenciando a polarização de macrófagos, a maturação de células dendríticas e as respostas das células T. Perturbações genéticas ou funcionais de IL10RA estão associadas a desregulação imunitária e fenótipos de doença inflamatória, sustentando a sua relevância em estudos de sinalização de citocinas, interações hospedeiro–microbioma e imunidade de barreira.
IL-10Rα O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IL10RA em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IL10RA. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IL10RA. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IL10RA interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.