IK1 Lentiviral Ativação Partículas de ativação de lentivirus (h): sc-402139-LAC

KCNN4 codifica o canal de K+ ativado por Ca2+ de condutância intermediária IK1 (KCa3.1), uma proteína de membrana que acopla sinais intracelulares de cálcio ao efluxo de potássio e à hiperpolarização da membrana. Ao moldar o potencial de membrana e a entrada de cálcio, o IK1 influencia processos como a regulação do volume celular, o transporte epitelial de eletrólitos e a sinalização dependente de ativação em células imunes. A atividade de KCNN4/IK1 cruza-se com vias dependentes de Ca2+ que modulam proliferação, migração e respostas de citocinas, tornando-a relevante para estudos de inflamação e remodelação tecidual. Alterações na função do IK1 têm sido associadas a mudanças patológicas na biologia vascular, das vias aéreas e do sistema imune, sustentando seu uso como alvo mecanístico em modelagem de doenças.

As Partículas de Ativação Lentivirais IK1 (h) respondem a esta necessidade ao encapsular o sistema completo de ativação transcricional do mediador de ativação sinérgica (SAM) em partículas lentivirais de alto título, prontas para transdução, permitindo uma regulação positiva eficiente de KCNN4 numa gama mais ampla de tipos de células humanas.

As Partículas de Ativação Lentivirais IK1 (h) fornecem todos os componentes funcionais do sistema mediador de ativação sinérgica (SAM) através da transdução lentiviral. O sistema compreende três preparações de partículas co-transduzidas em células-alvo: uma que codifica dCas9 cataliticamente inativo (mutações D10A e N863A) fundido ao domínio de transativação VP64 com um gene de resistência à blasticidina; uma que codifica a proteína de fusão MS2-p65-HSF1 com um gene de resistência à higromicina; e uma que codifica um sgRNA de 20 nt específico do alvo, fundido a dois aptâmeros de RNA MS2 com um gene de resistência à puromicina. Após a transdução lentiviral e a integração genómica das cassetes de expressão, os componentes do SAM são expressos de forma estável e reúnem-se no locus-alvo dentro da região promotora proximal a montante do local de início da transcrição KCNN4, onde VP64, p65 e HSF1 atuam cooperativamente para recrutar a maquinaria transcricional endógena e impulsionar a regulação positiva sustentada da expressão endógena de IK1. A utilização de dCas9 inativo em termos de nuclease evita a introdução de quebras de DNA de cadeia dupla e preserva o locus genómico nativo KCNN4 e a arquitetura reguladora.

O formato lentiviral oferece várias vantagens práticas: a integração genómica estável suporta a ativação hereditária ao longo das divisões celulares; as preparações de partículas de alto título eliminam a necessidade de produção viral interna; e a compatibilidade com tipos de células primárias, não divisíveis e resistentes à transfecção amplia a acessibilidade experimental. A transdução bem-sucedida pode ser confirmada e enriquecida através de seleção tripla com antibióticos utilizando puromicina, higromicina e blasticidina.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.