Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402139-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IK1O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IK1 (h) e o Plasmídeo Double Nickase IK1 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para KCNN4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IK1 Anticorpo (D-5): sc-365265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402139-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IK1 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402139-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O KCNN4 humano codifica o IK1 (KCa3.1), um canal de K+ ativado por Ca2+ de condutância intermediária que acopla sinais citosólicos de Ca2+ à hiperpolarização da membrana e ao efluxo de K+. Ao moldar o potencial de membrana e impulsionar a entrada de Ca2+, o IK1 influencia a sinalização dependente de cálcio, a regulação do volume celular e programas transcricionais a jusante que controlam proliferação, migração e ativação de células imunes. A atividade do IK1 é comumente estudada em vias que envolvem regulação por Ca2+/calmodulina, entrada de Ca2+ operada por estoques (SOCE) e remodelamento do citoesqueleto. A desregulação da função KCNN4/IK1 tem sido associada a processos inflamatórios e imunomediados, remodelamento vascular e comportamentos de crescimento alterados em diversos tipos celulares, sustentando sua relevância para a modelagem mecanística de doenças.
IK1 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus KCNN4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de KCNN4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função KCNN4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com KCNN4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.