Ihh Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-401466-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IhhO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Ihh (h) e o Plasmídeo Double Nickase Ihh (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IHH. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Ihh Anticorpo (H-12): sc-271101
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Ihh Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-401466-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Ihh Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-401466-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
O gene *Indian hedgehog* (IHH) codifica a Ihh, um morfógeno secretado que sinaliza por meio de PTCH1/SMO para ativar fatores de transcrição GLI e regular decisões de destino celular durante o desenvolvimento. A Ihh desempenha papéis centrais na ossificação endocondral, na proliferação e hipertrofia de condrócitos e na coordenação do comprometimento da linhagem de osteoblastos, integrando-se a vias que controlam a produção de matriz extracelular e a organização da placa de crescimento. Na biologia humana, alterações na sinalização de IHH estão associadas a defeitos no padrão esquelético e à atividade desregulada da via Hedgehog, tornando-o um nó-chave para o estudo de gradientes de morfógenos e da homeostase tecidual. Como componente de uma via com efeitos dependentes do contexto, IHH é frequentemente utilizado para investigar programas transcricionais conduzidos por Hedgehog e dinâmicas de diferenciação.
Ihh O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IHH em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IHH. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IHH. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IHH interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.