IGFBP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421067

Visão geral

Igfbp6 codifica a proteína 6 ligadora do fator de crescimento semelhante à insulina (IGFBP6), um regulador secretado da sinalização do IGF com alta afinidade por IGF‑II, que modula a biodisponibilidade do ligante e a ativação do receptor. Ao sequestrar o IGF‑II e influenciar sua distribuição no espaço extracelular, a IGFBP6 pode moldar a atividade das vias PI3K–AKT e MAPK, impactando assim a proliferação, a diferenciação, a sobrevivência e a adaptação metabólica. Em tecidos de camundongo, a expressão de Igfbp6 contribui para programas de desenvolvimento e homeostase tecidual, e alterações na atividade de IGFBP6 têm sido estudadas em contextos nos quais a desregulação do eixo IGF está implicada, incluindo biologia do câncer e fenótipos cardiometabólicos. Sua localização extracelular também a torna relevante para estudos de comunicação parácrina e do controle microambiental da sinalização por fatores de crescimento.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IGFBP6 (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Igfbp6 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Igfbp6, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Igfbp6 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IGFBP6.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Igfbp6 para a investigação da sinalização de IGFBP6, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Igfbp6 críticos para a função IGFBP6
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Igfbp6 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo IGFBP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IGFBP6 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Igfbp6. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo IGFBP6 Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IGFBP6 (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Igfbp6 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Igfbp6 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.