Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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IGFBP5 Plasmide Double Nickase (m): sc-421066-NIC
- Specie Target: mouse
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- IGFBP5 Plasmide Double Nickase (m) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il IGFBP5 Double Nickase Plasmid (m) e il IGFBP5 Double Nickase Plasmid (m2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira Igfbp5. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: IGFBP5 Antibody (D-6): sc-515116
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
IGFBP5 Plasmide Double Nickase (m) | sc-421066-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP5 Plasmide Double Nickase (m2) | sc-421066-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene murino *Igfbp5* codifica la proteina legante i fattori di crescita insulino-simili 5 (IGFBP5), un regolatore secreto e associato alla matrice extracellulare (ECM) che modula la biodisponibilità e la segnalazione di IGF-I/IGF-II attraverso le vie IGF1R–PI3K/AKT e MAPK. Oltre al sequestro degli IGF, IGFBP5 può influenzare adesione, migrazione e sopravvivenza cellulari tramite interazioni con componenti della ECM e attività IGF-indipendenti dipendenti dal contesto. L’espressione di *Igfbp5* è collegata a processi di rimodellamento tissutale, inclusi miogenesi, osteogenesi e attivazione dei fibroblasti, rendendolo rilevante per studi su fibrosi, riparazione delle ferite e sviluppo scheletrico. Una regolazione alterata di IGFBP5 è stata associata a programmi di proliferazione e differenziamento modificati nei microambienti tumorali e nel rimodellamento stromale, supportandone l’impiego come nodo meccanicistico nella ricerca sulla segnalazione dei fattori di crescita.
IGFBP5 Il plasmide Double Nickase (m) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus Igfbp5 nelle linee cellulari mouse. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di Igfbp5. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di Igfbp5. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con Igfbp5 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.