Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
IGFBP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-402342-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IGFBP4O plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase IGFBP4 (h) e o Plasmídeo Double Nickase IGFBP4 (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para IGFBP4. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:IGFBP4 Anticorpo (A3): sc-517440
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IGFBP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-402342-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
IGFBP4 Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-402342-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
A proteína 4 ligadora de fatores de crescimento semelhantes à insulina (IGFBP4) é um modulador secretado da biodisponibilidade de IGF-I e IGF-II que regula a interação com receptores e a sinalização downstream por PI3K–AKT e MAPK, moldando programas celulares de proliferação, sobrevivência e diferenciação. Ao se ligar aos IGFs no meio extracelular, a IGFBP4 pode ajustar gradientes de fatores de crescimento e respostas parácrinas/autócrinas em contextos de remodelamento tecidual, incluindo microambientes vasculares e estromais. Alterações na expressão ou no processamento da IGFBP4 têm sido associadas à desregulação da sinalização de crescimento observada em fibrose, disfunção metabólica, remodelamento cardiovascular e múltiplos fenótipos relacionados ao câncer. Consequentemente, a IGFBP4 é frequentemente estudada como um regulador dependente do contexto da atividade do eixo IGF e da dinâmica de sinalização extracelular.
IGFBP4 O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus IGFBP4 em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de IGFBP4. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função IGFBP4. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com IGFBP4 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.