IFT88 Lentiviral Activation Particles (h): sc-404089-LAC

ヒトIFT88は、一次繊毛に沿った順行性輸送を担う鞭毛内輸送B（IFT-B）複合体の中核構成要素をコードしており、軸糸（アクソネーム）の組み立てと維持、ならびに適切な繊毛シグナル伝達を可能にします。繊毛依存的なシグナル伝達を支えることで、IFT88はHedgehog経路をはじめ、健全な繊毛構造とタンパク質輸送に依存する各種感覚受容体連関プロセスなどの経路に影響します。IFT88の機能破綻や発現制御の異常は、繊毛形成（シリオジェネシス）を阻害し、下流の転写プログラムを変化させ、繊毛をもつ細胞種における細胞周期や極性制御にも影響を及ぼします。そのため、IFT88は一次繊毛機能が重要な要因となる繊毛病（ciliopathy）、腎臓・網膜の表現型、発生シグナル伝達の異常といった文脈で広く研究されています。

IFT88 レンチウイルス活性化粒子（h）は、完全な相乗的活性化メディエーター（SAM）転写活性化システムを、トランスダクション可能な高力価レンチウイルス粒子に封入することでこのニーズに対応し、より広範なヒト細胞タイプにおいて効率的なIFT88の発現上昇を可能にします。

IFT88 レンチウイルス活性化粒子（h）は、レンチウイルス媒介を介して、シナジー活性化メディエーター（SAM）システムのすべての機能的構成要素を届ける。このシステムは、標的細胞へ共導入される3種類の粒子製剤で構成されています。1つは、VP64転写活性化ドメインとブラスティシジン耐性遺伝子を融合させた、触媒活性のないdCas9（D10AおよびN863A変異）をコードするものです。ヒグロマイシン耐性遺伝子を有するMS2-p65-HSF1融合タンパク質をコードするもの；および、2つのMS2 RNAアプタマーと融合した標的特異的20塩基対sgRNAをコードし、プロマイシン耐性遺伝子を有するもの。レンチウイルスによる導入および発現カセットのゲノムへの組み込み後、SAM構成要素は安定して発現し、IFT88転写開始点の上流にある近位プロモーター領域内の標的座に集合する。そこでは、VP64、p65、およびHSF1が協調して作用し、内因性の転写機構を動員して、内因性IFT88の発現を持続的に上向きに調節する。ヌクレアーゼ不活性型dCas9を使用することで、二本鎖DNA切断の導入を回避し、天然のIFT88ゲノム座および制御機構を維持します。

レンチウイルス形式には、いくつかの実用的な利点があります。安定したゲノム組み込みにより、細胞分裂を経ても遺伝的に継承される活性化がサポートされます。高力価の粒子調製により、施設内でのウイルス生産の必要性がなくなります。また、初代培養細胞、非増殖性細胞、およびトランスフェクション抵抗性細胞との互換性により、実験の適用範囲が広がります。成功したトランスダクションは、プロマイシン、ハイグロマイシン、ブラスティシジンを用いた三重抗生物質選別により確認および選別が可能である。

研究用のみ。診断用または治療用ではありません。